S obzirom na narastajući epizootiološko epidemiološki problem bruceloze među stanovništvom Kosova i Metohije i nepostojanja veterinarske laboratorije na ovom prostoru ovim Zakonom, kao područje rada VSI „Kraljevo“ definiše se i deo teritorije Kosova i Metohije, i to: Kosovo Polje, Vučitrn, Vitina, Glogovac, Gnjilane, Kačanik, Lipljan, Novo Brdo, Obilić, Priština, Srbica, Uroševac, Štimlje, Štrpce, Prizren Gora, Dečani, Đakovica, Istok, Klina, Opolje, Orahovac, Peć, Suva Reka, Zubin Potok, Leposavić, Zvečan i Kosovska Mitrovica. 10.05.1993. godine doneta je odluka o osnivanju Epizootiološko-dijagnostičke stanice u Prištini – Kosovu Polju u okviru VSI „Kraljevo“. Na teritoriji Kosova i Metohije VSI „Kraljevo“ je obavljao specijalističku veterinarsku delatnost u periodu od 1992. do 1999. godine.
Danas, status Veterinarskog specijalističkog instituta definisan je na osnovu Zakona o izmenama i dopunama Zakona o zdravstvenoj zaštiti životinja („Sl.glasnik“ RS br.50/92) istovetan je i 2010. godine, sa izuzetkom dela tada definisane teritorije. Od 1999. godine područje Kosova i Metohije više nije u nadležnosti VSI „Kraljevo“. VSI „”Kraljevo“ je jedna od 12 specijalističkih veterinarskih ustanova u mreži specijalističke službe Republike Srbije. Ustanova je javna po svojoj funkciji, osnovana od strane Narodne Skupštine Republike Srbije, a Vlada imenuje Upravni odbor i direktora. Imovina VSI „Kraljevo“ je vlasništvo države 100%, a ustanova posluje na dohodovnom principu.